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Products 蛋白相关实验
产品名称: Western blot
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
免疫印迹(immunblotting)又称蛋白质印迹(western blot),他是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现在已成为蛋白分选的一种常规技术。免疫印迹(western blot)常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分选。 western blot一般步骤:蛋白质抽提,蛋白质定量,变性聚丙稀酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE),蛋白质转移,western blot膜的封闭和抗体孵育,western blot结果检测,western blot数据分析,提供实验报告。 western blot服务内容:专业的队伍,提供完整的实验步骤和结果,提供专业的数据分析,提供电子版扫膜结果,以及灰度值分析。目前,基尔顿生物主要实验技术服务,如果您对我们的产品感兴趣或有疑问,你可以通过网页咨询我们在线客服,或致电18017844061,我们将热情为...
产品名称: ELISA
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍ELISA以免疫学反应为基础,使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。二 、服务流程1、包被抗体2、加样3、加酶标抗体4、显色三 、客户提供细胞上清或血清、血浆、尿液等。ELISA检测试剂盒(可代购)四、交付内容实验报告:详细步骤、吸光度值等 五、服务列表   项目周期ELISA10个工作日
产品名称: SILAC
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
背景简介:SILAC( Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture)技术是依据细胞生长对必需氨基酸的依赖原理,利用稳定同位素标记( 13C,15N,2H)的必需氨基酸对细胞蛋白质组进行代谢标记的方法;13C,15N,2H是稳定同位素,没有放射性,因此可以在常规条件下进行试验。Arg(R)、Lys(K)、Leu(L)是SILAC最常用的氨基酸。将(13C,15N,2H)等稳定同位素标记的R、K、L加入细胞培养基中,在细胞进行蛋白质合成时,这些稳定同位素标记的氨基酸自然被“掺入”到蛋白质中。通过6代的细胞增殖,整个细胞的蛋白质组会被稳定同位素氨基酸”标记SILAC“标记”了蛋白质与“未标记”的蛋白质(普通培养基培养)存在一定数目的质量差异,该质量差异在后续LC-MS的一级质谱( MSl)中呈现一对同位素质谱峰,通过质谱峰的信号强度能精确实现对2组样品中每一个蛋白质表达水平的相对定量,最终能确定蛋白质表达水平差异(差异蛋白质组学分析)和区分特异性和非特异性相互作用(蛋白质相互作用分析);同时通过二级质谱( MS/MS,MS...
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍蛋白质、多肽等生物分子的高效液相分析,包含蛋白质/多肽的纯度鉴定,蛋白质/多肽的定量分析,天然/合成样品的纯度检测,蛋白质/多肽的指纹图谱分析,单糖/寡糖/多糖定性定量分析,混合物/粗提物分子量分布分析,代谢组分/小分子指纹图谱分析和蛋白/多肽/糖类的少量纯化制备二、客户提供1、样品含量:50-100 Pmol (液体约200 uL)2、样品形式:液体;干粉3、样品来源,检测指标,样本数量,样本信息三、交付内容实验报告,包括实验流程、仪器方法、原始数据及图片等。周期:4周
产品名称: TMT
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
简单介绍:iTRAQ和TMT的技术原理完全一样,所不同的是二者的分子结构有差异。与SILAC相比(标记蛋白质),iTRAQ和TMT是对肽段进行标记的。依据iTRAQ/TMT标签的质量数差异,通过MS实现对多组样品中的蛋白质进行相对定量:SILAC是通过一级MS( MSl)对蛋白质进行定量,而iTRAQ/TMT是通过二级MS( MS/MS.MS2)进行定量的。 iTRAQ/TMT几乎能兼容所有来源的蛋白质样品,并且能同时分析多达8-10组的样品,分析通量高。 1、分别提取蛋白质并定量;2、Trypsin分别对蛋白进行酶解,提取肽段;3、用不同质量数的iTRAQ/TMT标签分别对肽段样品进行标记:4、标记完成后,混合样品,用SCX进行组分分离(15-20组分);5、对每个组分进行LC-MS分析:6、蛋白质鉴定与定量分析,筛选差异表达的蛋白;7、生物学实验验证(Western blot,EUSA等): 技术优势1、高通量,能同时进行多达8-10组样品蛋白质组的定性与定量分析; 2、几乎兼容所有来源的样品(动植物组织、细菌、血液等); 3、实验周期短。
产品名称: Label free
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
Label free: 非标定量蛋白质组学技术;比如你有10个组织样品,分别提取蛋白质并酶解成肽段。然后每一个肽段样品进行LC-MS分析,这样就得到10个MS数据;对于1条肽段,其在10个样品中的丰度(量)与其在MS1中的峰面积或信号强度成正比;理论上,对于10个样品中的同一条肽段,其在LC上的保留时间(retention time, RT)是一致的,因此,可以通过对比MS图谱,实现对蛋白质在不同样本中的相对表达水平的定量分析。 Label free技术特色:1、与SILAC, iTRAQ/TMT技术相比,样品无需任何标记,能最终程度地保留样品的“真实性”;2、样品处理步骤简单,蛋白质只需酶解即可进行LC-MS分析;3、能很大程度的节省样本制备费用。 Label free分析软件Maxquant,Progenesis 等
产品名称: iTRAQ
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
背景简介:iTRAQ和TMT的技术原理完全一样,所不同的是二者的分子结构有差异。与SILAC相比(标记蛋白质),iTRAQ和TMT是对肽段进行标记的。依据iTRAQ/TMT标签的质量数差异,通过MS实现对多组样品中的蛋白质进行相对定量:SILAC是通过一级MS( MSl)对蛋白质进行定量,而iTRAQ/TMT是通过二级MS( MS/MS.MS2)进行定量的;iTRAQ/TMT几乎能兼容所有来源的蛋白质样品,并且能同时分析多达8-10组的样品,分析通量高。  试验流程1、分别提取蛋白质并定量;2、Trypsin分别对蛋白进行酶解,提取肽段;3、用不同质量数的iTRAQ/TMT标签分别对肽段样品进行标记:4、标记完成后,混合样品,用SCX进行组分分离(15-20组分);5、对每个组分进行LC-MS分析:6、蛋白质鉴定与定量分析,筛选差异表达的蛋白;7、生物学实验验证(Western blot,EUSA等): 目前,基尔顿生物主营实验技术服务,欢迎广大科研爱好者前来咨询!
产品名称: EMSA实验
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
EMSA:凝胶迁移或电泳迁移率检测是一种检测蛋白质和DNA序列相结合的技术,最初用于研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用,可用于定性和定量分析。分为2种类型:同位素标记探针,非同位素标记探针。 通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异),和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。 实验步骤:探针的标记,探针的纯化,EMSA胶的配制,EMSA的结合反应,探针冷竞争反应,突变探针冷竞争,super-shi...
产品名称: 2D-DIGE
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
DIGE —双向荧光差异凝胶电泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE),是在传统双向电泳的基础上发展而来的新型蛋白质组学定量技术,其分离蛋白质混合的原理与双向电泳是一致的,主要利用蛋白质的等电点和分子量的差异来分离蛋白质混合物,同时应用荧光染料的灵敏度及内标的使用等技术,使其在定量蛋白质组学的研究中效果明显优于传统双向电泳。 DIGE使用的荧光染料有Cy2, Cy3和Cy5,它们能与蛋白质的赖氨酸侧链氨基反应而使蛋白质被标记,被标记蛋白质的等电点和分子量几乎不受影响,等量混合标记好的蛋白质后进行双向电泳,不同凝胶之间可以通过cy2内标匹配,消除凝胶之间的差异,蛋白质表达量的变化则通过cy3和cy5不同荧光的强度来体现。 二、与常规双向电泳后,银染或考染胶相比,DIGE具有以下优势:  1、灵敏度高,最低可检测到125pg的蛋白质; 2、高效性,同一块凝胶上可以电泳两个样品,减轻了工作量; 3、线性范围更广,动态范围高达10-5; ...
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