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Products 病理学实验
产品名称: 免疫荧光
型号:
时间: 2014 - 10 - 30
一、服务介绍免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。 二、实验原理将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。 三、实验流程免疫荧光单标记方法免疫荧光单标记是指只标记一种蛋白质分子,方法比较简单,只要按照染色步骤去做,通常不存在太多的问题。但要注意固定液的选择,固定液选择的合适与否,可能会直接影响染色结果。具体染色方法如下。1、所需材料与试剂a, 培养在盖玻片或玻璃培养皿中融合程度达到60%-70%的细胞。b, 一抗、FITC或TRITC标记的二抗。c, 4%多聚甲醛固定液或冷丙酮固定液 (-20℃预冷20 min)。d, 封闭液。e, 0.01mol...
产品名称: 免疫组化
型号:
时间: 2014 - 10 - 31
免疫组化是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。 免疫组化的分类: 免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法等。 免疫组化主要步骤:1.洗载玻片2.包埋组织3.切片4.捞组织5.脱蜡6.抗原修复7.血清封闭8.加一抗9.加二抗10.加SABC11.加显色剂12.复染13.脱水14.封片 服务内容:包含抗体,包埋,切片,染色以及拍照。(每个样本提供一张照片包含阳性面积)加拍另外计费。
产品名称: HE染色
型号:
时间: 2014 - 11 - 01
常规染色或HE(Haematoxylin and eosin)染色。它是病理技术中最常用的一种方法,通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法,以达到准确,完整的病理诊断。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。 HE染色步骤:一般包含取材固定,脱水透明,浸蜡包埋,切片与贴片,脱蜡染色,脱水透明,封固等步骤。HE染色服务内容1.包埋,切片,染色,拍照等2.其他特殊染色,如普鲁士染色,Masson染色等 目前,基尔顿生物科技(上海)有限公司,主营实验技术服务,欢迎广大科研爱好者前来咨询选购!
产品名称: Timm染色
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍Timm染色方法是一种能够显示组织细胞内重金属分布的常用方法。苔藓纤维末端是脑内含锌量最高的区域,因此可以用此方法显示苔藓纤维末梢分布的情况。 二、实验原理Timm法是对离子状态、 疏松结合或螯合状态下的锌离子染色,便于光、电镜的观察。 三、实验流程:1.切片贴附于多聚赖氨酸处理过的载玻片上,-20°保存。2.做的时候拿出来晾干,约10分钟。3.把Timm显影剂倒入修复盒中,放在在26℃的水浴箱或恒温摇床里染色90-150 min,染色必须在避光的条件下进行。4.染色后,切片用蒸馏水冲洗几遍,可以尼式染色复染,也可不复染。5.晾干,中性树脂封胶片。 四、客户提供样本 五、公司提供图片,结果及分析实验周期:3-4周
产品名称: Masson染色
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍Masson染色用于胶原纤维和肌纤维的染色及鉴定;染色结果:胶原纤维呈蓝色、肌纤维呈红色、细胞核呈蓝黑色。 二、实验原理1.胶原纤维是人体中的结缔组织的主要成分,分布在全身的各个部位,组成胶原纤维的主要成分是胶原蛋白。新鲜时呈白色,故一般称为白色纤维。在HE染色中被染为淡红色。它的性质是具有一定韧性及紧固性,因此它能够抵抗一定的牵拉力而不至于撕裂或拉断它们常聚集成粗细不等的束,呈波浪状。胶原纤维由许多根纤细的胶原纤维组成。在电镜下胶原原纤维又由更细的原纤维构成。根据Kramen和Little所进行的电镜研究证实,胶原纤维是特有的,具有横纹的(重复期为650)原纤维。当有病变时这些纤维可发生变形,常出现的就是胶原纤维的坏死,胶原纤维在稀酸里可发生膨胀,变成胶样物。它们能被酸性染料染成深浅不一的粉红色,这些往往跟淀粉样物难以区别。由于它们的屈光率较弱,因而在光学显微镜下,很难与纤维区别。胶原纤维的分子长度约为3000,直径约为14,分子量为300000。 2.胶原纤维的组成:1) 细胞内合成前胶原蛋白分子,成纤维细胞摄取合成蛋白质所需的氨基酸,包括脯氨酸、赖...
产品名称: 原位杂交
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
原位杂交(in situ hybridization)将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,称为原位杂交。用原位杂交技术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性,可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。 原位杂交实验步骤:前期胚胎的制备。原位杂交第一天进行重新水化和固定、预杂交、杂交。原位杂交第二天进行 1 将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)2加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。3置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。4置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。5用MABT洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。6室温下加1ml 1:2:7溶液,时间为一小时。 7 按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连地高辛抗体,4C 冰箱过夜。原位杂交第三天进行1) 用1ml含10%热灭活血清的MABT溶液置换抗体溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT...
产品名称: 透射电镜检测
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)是使用最为广泛的一类电镜。通过发射电子束从而穿过超薄的样品,同时与样本相互作用,既而形成图像。透射电镜具有分辨率高和放大倍数高的优点。其分辨率为0.1~0.2nm,放大倍数为几万到几十万倍。目前透射电镜已经广泛的应用到癌症研究,病毒学研究,微生物学,细胞学研究等生物领域。 二、实验原理透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像,投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,因此可以形成明暗不同的影像。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备超薄切片(通常为50~100 nm)。要在机体死亡后的数分钟内取材,组织块要小(1mm3以内),常用戊二醛和锇酸双重固定,包埋介质包埋,用超薄切片机切成薄片,再经醋酸铀和柠檬酸铅等进行电子染色。 三、实验流程1.取材2.固定3.脱水4.包埋5.固化6.超薄切片机切片(50-60 nm)7.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色8.透射电镜观察,...
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
服务介绍1)技术原理:石蜡切片(paraffin section)是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,大大缩短了制片时间。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤,因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片,并作为快速切片的方法应用在临床诊断 2)特点:石蜡切片标本可以长期保存使用,为永久性显微玻片标本。冰冻切片制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断.组织变化不大,能很好保存脂肪,类脂...
产品名称: 扫描电镜
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍 扫描电镜是1965年发明的较现代的细胞生物学研究工具,它具有制样简单、放大倍数可调范围宽、图像的分辨率高、景深大等特点。近年来,扫描电镜已广泛地应用在生物学、医学、等学科的领域中。 二、实验原理 主要是通过发射电子聚焦光束来扫描样品的表面形态.电子束与样品表面的样子发生作用,产生多种能够被检测的信号,这些信号就包含了样品的表面形态和组成.染色。 三、实验流程1. 样品的初步处理a.取材样品面积可达8mm×8mm,厚度可达5mm。对于易卷曲的样品如血管、胃肠道粘膜等,可固定在滤纸或卡片纸上,以充分暴露待观察的组织表面。b.样品的清洗(1)用等渗的生理盐水或缓冲液清洗;(2)用5%的苏打水清洗;(3)用超声震荡或酶消化的方法进行处理。c. 固定固定所用的试剂和透射电镜样品制备相同,常用戊二醛及锇酸双固定。由于样品体积较大,固定时间应适当延长。也可用快速冷冻固定。d. 脱水样品经漂洗后用逐级增高浓度的酒精或丙酮脱水,然后进入中间液,一般用醋酸异戊酯作中间液。2. 样品的干燥a.空气干燥法空气干燥法又称自然干燥法,就是将经过脱水的...
产品名称: 尼氏染色
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍尼氏(Nissl)染色液(Nissl Staining Solution)是神经生物学家广泛使用的一种Nissl染色液,用于石蜡或冰冻切片神经元细胞浆中的尼氏小体(Nissl body)染色。Nissl染色是以德国的精神病学家和神经病理学家Franz Nissl的名字命名的。 二、实验原理Nissl染色液染色后呈蓝紫色,常用于显示脑或脊髓的基本神经结构。Nissl小体大而数量多,说明神经细胞合成蛋白质的功能较强;相反在神经细胞受到损伤时,Nissl小体的数量会减少甚至消失。Nissl染色液染色的有效成分是碱性染料焦油紫(Cresyl violet),又名甲酚紫和克紫,它可以和RNA或DNA结合,可以染色粗面型内质网上的核糖体,也可以染色细胞核。染色后使细胞体呈现斑驳的(mottled)蓝紫色染色。也可以用thionine (硫荲);tolridine blue (甲苯胺蓝)等碱性染料。 三、实验流程:1.样本处理2.尼氏染色:染色3-10分钟,蒸馏水洗涤2次(每次数秒钟即可),95%乙醇约5s3.脱水、透明、封片 四、客户提供样本 五...
产品名称: 激光共聚焦
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。 激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope)是20世纪80年代中期发展起来并得到广泛应用的新技术 ,它是激光、电子摄像和计算机图像处理等现代高科技手段渗透,并与传统的光学显微镜结合产生的先进的细胞分子生物学分析仪器,在生物及医学等领域的应用越来越广泛,已经成为生物医学实验研究的必备工具 。 共聚焦显微镜用激光作为光源,采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图像处理观察、分析和输出。 其特点是可以对样品进行断层扫描和成像,进行无损伤观察和分析细胞的三维空间结构. 主要应用:在细胞及分子生物学基础研究中的应用,在肿瘤和抗癌药物筛选研究中的应用,在血液病学和医学免疫学研究中的应用,在大脑和神经科学中的应用,在眼科研究中的应用,在骨科研究领域中的应用。 服务内容:激光扫描共聚焦显微镜检测,激光透射共聚焦显微镜检测。组织和细胞中的定量荧光测定,细胞间通讯的...
产品名称: TUNEL检测
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
TUNEL检测的原理:细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC)标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。TUNEL检测(石蜡切片)取下适当的新鲜的组织块固定于4%-10%浓度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛与组织块体积比在10:1和20:1之间,4摄氏度保存运输;TUNEL检测(冰冻切片)取下的新鲜组织应立即放入超低温冰箱或者液氮中,用干冰运输,固定好的切片应于-80或者-20度保存,并尽快用于检测;TUNEL检测(细胞爬片)细胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,换PBS缓冲液4度保存运输,尽快用于检测 ...
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