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产品名称: 表达谱芯片
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
表达谱芯片:是采用cDNA或寡核苷酸片段作探针,固化在芯片上;将待测样品(处理组)与对照样品的mRNA以两种不同的荧光分子进行标记,然后同时与芯片进行杂交,通过分析两种样品与探针杂交的荧光强度的比值,来检测基因表达水平的变化。 实验过程:RNA 提取,之后反转录成CDNA,体外转录合成cDNA,荧光标记,cRNA片段化,芯片杂交,洗涤,扫描。 服务内容:专业的技术服务,独特的喷墨原位合成技术,灵活的定制方案,仅需基因组或EST序列,客户即可任意制作自己的芯片。
产品名称: 血管生成技术
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍肿瘤血管生成是一个极其复杂的过程,一般包括包括血管内皮基质降解、内皮细胞移行、内皮细胞增殖、内皮细胞管道化分支形成血管环和形成新的基底膜等步骤。由于肿瘤组织这种新生血管结构及功能异常,且血管基质不完善,这种微血管容易发生渗漏,因此肿瘤细胞不需经过复杂的侵袭过程而直接穿透到血管内进入血流并在远隔部位形成转移。血管生成(Angiogenesis)是指源于已存在的毛细血管和毛细血管后微静脉新的毛细血管性血管的生长。无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。 二、服务流程方案设计预实验细胞处理及相关检测数据分析及出具实验报告 三、客户提供目的细胞及信息,实验分组及方案 四、交付内容实验报告,包括实验流程、仪器方法、原始数据及图片等。周期:2-3个月
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍 大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关,其中线粒体跨膜电位(MMP)的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一。它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。 二、实验原理 JC-1是一种碳氰化合物类阳离子荧光染料,可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-1在细胞内以聚合体和单体两种不同的物理形式存在,分别处于不同的荧光发射峰。当JC-1 浓度低或膜电位水平低时,主要以单体形式存在,激发波长为527nm,呈绿色荧光;当JC-1浓度升高或线粒体膜电位水平较高时,形成聚合物,发出红色的荧光,激发波长为590nm。当细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度减弱,以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光,根椐这一特征就可以检测线粒体膜电位的变化。 三、实验流程1. 细胞培养;2. 用适当的方法诱导细胞凋亡,同时设立阴性依照组合阳性对照组,收集细胞;3. 用PBS洗涤细胞三次,收集不多于1×106的细胞;4. 取100 μL 10×...
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍通过流式细胞仪PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为G1/G0期,S期和G2/M期,获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。将Annexin V 进行荧光素标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 二、服务流程1、细胞固定2、配置染色液3、细胞染色4、上机检测5、结果分析三、客户提供培养好的细胞(大于106)。四、交付内容实验报告:详细操作步骤、流式上机图片及统计分析结果。五、服务列表项目说明周期细胞周期流式检测PI染色5个工作日细胞凋亡流式检测Annexin V与PI标记5个工作日
产品名称: 细胞共培养
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍细胞共培养是指不同的细胞共同培养。共培养体系主要用于诱导细胞向另一种细胞分化,诱导细胞自身分化,维持细胞功能和活力,对细胞增殖进行调控等。细胞共培养体系包括直接共培养体系和间接共培养体系。直接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中,不同种类的细胞之间直接接触,研究分泌的细胞因子或直接接触等相互作用方式对细胞的影响;间接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上,然后将这两种载体置于同一培养环境之中,使不同种类的细胞共用同一种培养体系而不直接接触,从而研究细胞分泌和代谢产生的物质对另一种细胞的影响。 二、实验原理Transwell共培养可实现非接触性共培养,主要是运用一种特殊的共培养工具进行细胞共培养研究,探讨两种细胞的相互作用情况。transwell小室放入培养板中,小室内称为上室,培养板内称为下室,上下层有一张有通透性的聚碳酸酯膜,这层膜带有微孔,孔径最大为12.0 μm,最小为0.1 μm,小于3.0 μm孔径条件下,细胞不会迁徙通过,使得培养的两细胞不能相互接触。 三、实验流程直接共培养:1. 制备细胞悬液:消...
产品名称: 细胞实验
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时间: 2017 - 03 - 29
一、细胞培养1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏(可参阅后面有关章节)为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,最终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法,即从液氮中取出冻存管后,立即放入37℃水中,使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。 二、原代细胞分离凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可...
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍稳定细胞系是指将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。常用物理方法(电转)、化学方法(脂质体等)、生物方法(病毒)。 二、实验原理外源基因在细胞中的表达可分为两大类,一类是瞬时表达,一类是稳定表达(又叫永久表达)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,虽然可以达到高水平的表达,但通常只持续几天。后者外源DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因。建立稳定细胞株,一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶细胞进行筛选。最常用的抗性标记基因有潮霉素(hygromycin)、新霉素(neomycin)和嘌呤霉素(puromycin)。 三、实验流程1、载体构建(表达质粒载体、病毒载体);2、转染/感染;3、目的蛋白初步检测;4、抗生素筛选;5、目的蛋白再次检测(定性/半定量);6、单克隆细胞株稳定性检测。 四、 客户提供培养好的细胞 五、 公司提供:基本实验步骤、图片、数据...
产品名称: 平板克隆
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时间: 2017 - 03 - 29
平板克隆形成项目介绍:当单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,称为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞,大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力,各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变,通过计数克隆形成率可对单个细胞的增殖潜力做定量分析,了解细胞的增殖能力和独立生存能力。软琼脂培养或平板克隆是最长用的方法。 平板克隆形成实验流程:调整细胞状态→制备单细胞悬液→按不同的细胞浓度梯度把细胞均匀接种于培养平板→培养10-14天→观察克隆情况,Giemsa染色后计算克隆形成率 平板克隆结果提供:实验结果图、数据和实验报告
产品名称: 流式细胞分选
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时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍流式细胞分选技术是利用流式细胞分选仪,以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术。分选后的细胞能直接用于培养、移植、核酸提取、单细胞PCR扩增或原位杂交等。.. 二、服务流程1、配置染色液2、细胞染色3、上机检测并设定分选条件4、分选细胞5、上机回测,检测纯度 三、客户提供1、血液样本或细胞样本。2、分选所采用的荧光、荧光抗体(或由公司代购) 四、交付内容1、分离后的细胞。2、实验报告:详细操作步骤、分选图片五、服务列表项目内容周期流式细胞分选包括前期分离,上机检测。分常规荧光(如FITC,PE,CY5.5,APC等)和特殊荧光(如紫外激发光)。检测波长为488 nm和633 nm15个工作日
产品名称: 干细胞诱导分化
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时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍干细胞诱导分化是诱导干细胞定向分化,使之成为成熟的功能细胞,是目前干细胞研究的关键环节。 干细胞是一种未充分分化,具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞,具有再生各种组织器官和人体的潜在功能,医学界称为“万用细胞”。如:骨髓间充质干细胞是位于骨髓基质中的一类中胚层来源的未分化细胞,在体内外均发现有极强的增殖能力,具有很强的自我更新和多向分化潜能。在一定诱导条件下,可以分化为成骨细胞、成软骨细胞和成肌细胞等,还可以分化为巨噬细胞、脂肪细胞、内皮细胞和成纤维细胞等骨髓基质细胞,具有发育为骨、软骨、脂肪、肌肉、真皮及骨髓基质等中胚层组织的潜能。 二、实验原理在体胚胎分化过程中,组织发生和身体构造的形成具有时空顺序性和相互诱导性。在个体发育过程中,细胞分化是程序控制的有序有规律过程,程序的运行结果表现为不同发育阶段、不同组织部位的细胞表现出不同的形态、不同的生长方式和不同的生理功能。从分子水平上来看,这一结果取决于细胞在基因表达上的时空差异,这种基因表达差异除由细胞内在发育程序决定外,还受细胞外环境影响和调控,且有时这种外部控制条件或环境对形...
产品名称: 磁珠分选
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时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍磁珠分选是借助偶联在磁性微粒上抗体高特异性识别并标记目标细胞表面抗原,再让混有磁珠的细胞悬液通过磁场,结合了磁珠的细胞被吸附在磁场侧壁上,而未结合的细胞被除去,得到纯化的目标细胞,从而实现高效的分选与富集。由于其原理主要是借助抗体抗原识别,通常又称为免疫磁珠法,可以在几分钟内从复杂的细胞混合物中分离出很高纯度的细胞。二、服务流程1、离心收集分离细胞2、加入一抗3、加入相应二抗包被的超微磁珠4、将分离柱放入磁场进行分离三、客户提供1、血液、细胞2、分选细胞的特异性表达因子四、交付内容分选好的细胞五、服务列表项目周期磁珠分选10个工作日
产品名称: TUNEL检测
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时间: 2017 - 03 - 29
TUNEL检测的原理:细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC)标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。TUNEL检测(石蜡切片)取下适当的新鲜的组织块固定于4%-10%浓度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛与组织块体积比在10:1和20:1之间,4摄氏度保存运输;TUNEL检测(冰冻切片)取下的新鲜组织应立即放入超低温冰箱或者液氮中,用干冰运输,固定好的切片应于-80或者-20度保存,并尽快用于检测;TUNEL检测(细胞爬片)细胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,换PBS缓冲液4度保存运输,尽快用于检测 ...
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