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Products 细胞实验

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产品名称：真核基因转染

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时间： 2017 - 03 - 29

一、服务介绍细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。目前，将外源物质导入细胞的方法主要分为三大类：1、脂质体（或是脂质体替代物）转染；2、电转；3、病毒感染。转染技术又可分为瞬时转染和稳定转染基因的功能研究可分为loss-of-function和gain-of-function，即通过过表达该基因和抑制内源基因的表达的手段来研究某个基因的生物学功能。常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染（转染）。瞬时转染服务介绍通过脂质体介导转染法基因转染技术，将靶基因导入细胞，一般在转染后48小时左右，靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的，48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（短时间即可进行观察，但效应会很快丢失）服务流程1、接收质粒、细胞2、细胞培养3、转染4、拍照5、效率鉴定客户提供：1、构建好的外源基因载体，或由本公司进行载体构建（需提供目的基因名称、种属、序列或Gene Accession Number）。2、待转染的细胞系（1×106个细胞，可传代，倍增时间小于48...

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产品名称：生物信息学

型号：

时间： 2017 - 03 - 29

随着生命科学和计算机科学的飞速发展，生物信息学作为两者相结合的一门新学科，已广泛应用于生命科学的多个领域，成为解决科学问题的一个重要工具。科研工作者们具有专业的背景，然而如何运用生物信息学服务解决科学问题，是大家都面临的问题。丰核信息为广大科研工作者提供专业的生物信息服务，与您一起解决科学问题。一、服务介绍近几年，实验数据不断积累并存储在公用数据库中，可供广大科研工作者下载使用。因此，对这些数据进行整理，并进一步深度挖掘，已成为一个重要研究方法。二、服务流程1、客户提供研究方向2、生信工程师提供分析提纲3、反馈沟通4、进行数据分析5、出具分析报告三、研究案例展示（芯片分析）研究背景肝癌可以分为三种类型：肝细胞癌、胆管细胞性肝癌和混合性肝癌。本研究的目的是为了寻找这三种肝癌基因表达情况的不同点和相同点。研究策略1 从NCBI GEO数据库中下载转录表达谱，包括70张肝细胞癌芯片，13张胆管细胞性肝癌芯片和7张混合性肝癌芯片。2 对三种类型的肝癌进行两两比较，寻找差异基因。3 蛋白互作网络构建，聚类分析，MCODE分析...

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产品名称：全基因组重测序

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时间： 2017 - 03 - 29

一、服务介绍全基因组重测序是对基因组序列已知物种的个体进行基因组测序，并在个体或群体水平进行差异性分析的方法。基于全基因组重测序技术，我们能够快速的进行种子资源普查筛选，寻找到大量基因变异，并实现遗传进化分析及重要性状候选基因预测。而随着测序成本降低和已知基因组序列的物种增多，重测序已成为动植物育种研究中为迅速有效的方法之一。二、操作流程提取基因组 DNA 并随机打断，电泳回收所需长度的 DNA 片段，并加上接头进行 Cluster制备，后上机测序。利用双末端（ Paired-End）的方案对插入片段两端进行测序，除获得序列信息外，还有利于大片段结构变异的挖掘。三、指标评价测序深度是评价测序量的重要指标，测序深度的增加有利于基因组覆盖度的上升，并同时减少测序的错误率。在重测序个体水平采用双末端测序，当测序深度在 10X 以上时，基因组覆盖度和测序错误率控制均得以。而在群体方面，3-5X 即可得到。

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产品名称：基因芯片

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时间： 2017 - 03 - 29

基因芯片广泛用于模式物种的DNA、RNA和表观遗传等研究。丰核信息提供SNP芯片、RNA芯片、甲基化芯片分析服务，涵盖人类和主要模式物种。丰核信息拥有自主知识产权的标准芯片分析系统，可以快速分析包括Illumina、Agilent、Affy等公司出品的常规基因芯片。常见芯片列表项目分类名称描述Illumina SNP芯片Human omni-zhonghua-8 beachip包含90万个位点Agilent表达谱芯片Agilent SurePrint G3 Human Gene Expression 8×60K V2涵盖50,599条转录本信息Agilent SurePrint G3 Mouse Gene Expression 8×60K涵盖55,681条转录本信息Agilent SurePrint G3 Rat Gene Expression 8×60K涵盖30,003条Entrez Gene RNAsAgilent miRNA芯片Agilent Human miRNA Array V19.0覆盖2006个人类相关miRNAAgilent R...

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产品名称：过表达慢病毒构建及包装

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时间： 2017 - 03 - 29

一、过表达慢病毒构建及包装特点：1. 直接包装成为假病毒颗粒，对分裂和非分裂细胞均有感染作用，适合RNAi研究和体内实验中难于转染的细胞 (比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞)。2. 可以通过简单方式，在短时间内获得稳定表达特定基因的多种细胞株。3. 可用于基因敲除、基因治疗和转基因动物研究。4.无需转染试剂，操作简便。5.可以根据客户需要制备多种标记。二、过表达慢病毒构建及包装原理：慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达。三、过表达慢病毒构建及包装流程：1. 含有目的基因的慢病毒表达载体的构建和质粒纯化提取。注：客户也可以提供构建好的...

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产品名称：定点突变

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时间： 2017 - 03 - 29

一、服务介绍定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，是基因研究工作中一种非常有用的手段。通过PCR等方法向目的DNA片段（可以是基因组，也可以是质粒）中引入所需变化（通常是表征有利方向的变化），包括碱基的插入、删除、转换和颠换等。二、服务流程1）PCR摸索佳模板浓度2）DMT酶体外消化PCR产物3）转化DMT感受态细胞4）挑克隆培养三、客户提供1、含待变基因的质粒一份，量不少于1.0 μg。2、待变基因原始序列文件。四、交付内容1、不少于1μg的突变后的质粒一份。2、含上述质粒的菌株一份。3、实验报告：详细步骤、测序结果。五、服务列表项目说明周期基因定点突变，长度 1个突变10个工作日2个突变10个工作日3个突变10个工作日3个以上突变点需根据具体方案而定基因定点突变，长度 1个突变15个工作日2个突变15个工作日3个突变15个工作日3个以上突变点需根据具体方案而定基因定点突变，长度2.5 kb 基因定点突变，长度需根据具体方案而定基因定点突变，长度需根据具体方案而定基因定点突变，长度需根据具...

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产品名称：表达谱芯片

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时间： 2017 - 03 - 29

表达谱芯片:是采用cDNA或寡核苷酸片段作探针，固化在芯片上；将待测样品（处理组）与对照样品的mRNA以两种不同的荧光分子进行标记，然后同时与芯片进行杂交，通过分析两种样品与探针杂交的荧光强度的比值，来检测基因表达水平的变化。实验过程：RNA 提取，之后反转录成CDNA，体外转录合成cDNA,荧光标记，cRNA片段化，芯片杂交，洗涤，扫描。服务内容：专业的技术服务，独特的喷墨原位合成技术，灵活的定制方案，仅需基因组或EST序列，客户即可制作自己的芯片。

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产品名称：血管生成技术

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时间： 2017 - 03 - 29

一、服务介绍肿瘤血管生成是一个极其复杂的过程，一般包括包括血管内皮基质降解、内皮细胞移行、内皮细胞增殖、内皮细胞管道化分支形成血管环和形成新的基底膜等步骤。由于肿瘤组织这种新生血管结构及功能异常，且血管基质不完善，这种微血管容易发生渗漏，因此肿瘤细胞不需经过复杂的侵袭过程而直接穿透到血管内进入血流并在远隔部位形成转移。血管生成（Angiogenesis）是指源于已存在的毛细血管和毛细血管后微静脉新的毛细血管性血管的生长。无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤，一旦生长直径超过1~2 mm，都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子，诱导血管生成。二、服务流程方案设计预实验细胞处理及相关检测数据分析及出具实验报告三、客户提供目的细胞及信息，实验分组及方案四、交付内容实验报告，包括实验流程、仪器方法、原始数据及图片等。周期：2-3个月

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产品名称：线粒体膜电位(MMP)检测

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时间： 2017 - 03 - 29

一、服务介绍大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（MMP）的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中早发生的事件之一。它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。二、实验原理 JC-1是一种碳氰化合物类阳离子荧光染料，可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-1在细胞内以聚合体和单体两种不同的物理形式存在，分别处于不同的荧光发射峰。当JC-1 浓度低或膜电位水平低时，主要以单体形式存在，激发波长为527nm，呈绿色荧光；当JC-1浓度升高或线粒体膜电位水平较高时，形成聚合物，发出红色的荧光，激发波长为590nm。当细胞发生凋亡时，线粒体跨膜电位被去极化，JC-1从线粒体内释放，红光强度减弱，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光，根椐这一特征就可以检测线粒体膜电位的变化。三、实验流程1. 细胞培养；2. 用适当的方法诱导细胞凋亡，同时设立阴性依照组合阳性对照组，收集细胞；3. 用PBS洗涤细胞三次，收集不多于1×106的细胞；4. 取100 μL 10×...

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产品名称：细胞周期和凋亡检测

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时间： 2017 - 03 - 29

一、服务介绍通过流式细胞仪PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时，可以将细胞周期各时相区分为G1/G0期，S期和G2/M期，获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。将Annexin V 进行荧光素标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶（Propidium Iodide,PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。二、服务流程1、细胞固定2、配置染色液3、细胞染色4、上机检测5、结果分析三、客户提供培养好的细胞（大于106）。四、交付内容实验报告：详细操作步骤、流式上机图片及统计分析结果。五、服务列表项目说明周期细胞周期流式检测PI染色5个工作日细胞凋亡流式检测Annexin V与PI标记5个工作日

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产品名称：细胞共培养

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时间： 2017 - 03 - 29

一、服务介绍细胞共培养是指不同的细胞共同培养。共培养体系主要用于诱导细胞向另一种细胞分化，诱导细胞自身分化，维持细胞功能和活力，对细胞增殖进行调控等。细胞共培养体系包括直接共培养体系和间接共培养体系。直接共培养体系，即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中，不同种类的细胞之间直接接触，研究分泌的细胞因子或直接接触等相互作用方式对细胞的影响；间接共培养体系，即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上，然后将这两种载体置于同一培养环境之中，使不同种类的细胞共用同一种培养体系而不直接接触，从而研究细胞分泌和代谢产生的物质对另一种细胞的影响。二、实验原理Transwell共培养可实现非接触性共培养，主要是运用一种特殊的共培养工具进行细胞共培养研究，探讨两种细胞的相互作用情况。transwell小室放入培养板中，小室内称为上室，培养板内称为下室，上下层有一张有通透性的聚碳酸酯膜，这层膜带有微孔，孔径大为12.0 μm，小为0.1 μm，小于3.0 μm孔径条件下，细胞不会迁徙通过，使得培养的两细胞不能相互接触。三、实验流程直接共培养:1. 制备细胞悬液：消化细...

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产品名称：细胞实验

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时间： 2017 - 03 - 29

一、细胞培养1取材在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏（可参阅后面有关章节）为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以的冷却速度冻存，终保存于液氮中。在较低的温度下，细胞保存的时间是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。二、原代细胞分离凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的...

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