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Products 细胞实验
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation, ChIP)是用于研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。ChIP不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。 二、服务流程1、甲醛处理细胞2、加入目的蛋白抗体3、加入proteinA4、沉淀抗体-靶蛋白-DNA复合物5、解交联6、PCR分析 三、客户提供1、细胞。2、ChIP级别的抗体。3、如ChIP结束后进行检测,input作为对照;如结束后进行q-PCR,则需要提供预测靶基因结合位点的具体序列或目标靶基因的名称、种属、序列或GeneBank Acession Number。 四、交付内容实验报告:详细步骤、seq后或q-PCR分析后的结果 五、服务列表项目 备注 周期 ChIP 含一个阳性基因和一个阴性基因检测 20个工作日 Seq input作为对照 20个工作日 q-PCR 包括引物设计,三个重复,i...
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍分子克隆是在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用体外重组方法将它们插入克隆载体,形成重组克隆载体,通过转化与转导的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。  二、实验原理外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。DNA连接酶有两种:T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能,而且T4噬菌体DNA连接酶还有—种大肠杆菌连接酶没有的特性,即能使两个平末端的双链DNA分子连接起来。但这种连接的效率比粘性末端的连接效率低,一般可通过提高T4噬菌体DNA连接酶浓度或增加DNA浓度来提高平末端的连接效率。 T4噬菌体DNA连接酶催化DNA连接反应分为3步:,T4DNA连接酶与辅助因子AT...
产品名称: 流式检测
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
流式检测大致分为流式细胞术、细胞周期检测、细胞增殖检测、细胞因子检测 一、流式细胞术(FlowCytometry,FCM):   就是对在高速流动的鞘液包裹下的细胞、粒子进行分析和分选的技术,这种细胞或粒子是经过特异荧光标记的。其特点是测量速度快,每秒钟能测数千个乃至上万个细胞,且可进行多参数测量,另一特点是在分析的同时可把具有指定特征的细胞分离出来,这就是分选技术。   重要参数:前向角散射(FSC):前向角散射光的强度与细胞的大小有关,也就是说,同一个细胞群体,FSC强的,其细胞大一些,而FSC弱的,其细胞小一些。侧向角散射(SSC):侧向角散射又称90°散射或大角散射。侧向角散射光对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感,对胞内较大的颗粒也会有反应。所以,侧向角散射光的强弱可反应细胞内精细结构和颗粒的性质。荧光信号(FL):是细胞或细胞上的荧光染料被激光激发后发射出的荧光,不同的荧光染料其发射波长不同。通过荧光强度可将同一个细胞群体中的有荧光标记的细胞与无荧光标记的细胞区分开来,也就是我们通常所说的阳性细胞,也可以将阳性细胞...
产品名称: 原代细胞分离
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、细胞培养1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的初次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏(可参阅后面有关章节)为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以的冷却速度冻存,终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间是无限的。复苏一般采用快融方法,即从液氮中取出冻存管后,立即放入37℃水中,使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。 二、原代细胞分离凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的...
产品名称: 细胞侵袭实验
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
细胞侵袭实验目的:研究趋化因子或其他营养物质对细胞侵袭的影响。实验原理:将细胞种于上室,趋化因子等种于下室,细胞会向营养成分高的下室跑。与迁移实验不同是侵袭实验需要在小室聚碳酸酯膜上铺设一层基质胶。用以模仿体内细胞外基质,细胞欲进入下室,先要分泌基质金属蛋白酶(MMPs)将基质胶降解,方可通过聚碳酸酯膜。计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的侵袭能力。实验材料仪器:超净工作台、CO2培养箱、生物倒置显微镜实验内容与方法:1. 将细胞种于上室,趋化因子等种于下室2. 培养时间后观察计数细胞形态或测定相关理化性质客户提供实验信息:1、实验信息(客户提供):2、实验材料提供(1)样本材料:生长状况良好的宿主细胞株,细胞培养条件(2)试剂:Transwell小室需客户提供或委托我公司代购,如有药物则提供加药浓度结果提交:提交实验报告书(实验试剂与设备、实验过程、结果分析、原始数据、细胞图片等); 目前,基尔顿生物主营实验技术服务,如想了解细胞侵袭的更多内容,你可以通过网页咨询在线客服,或致电我们将热情为您服务!
产品名称: 细胞迁移
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍细胞迁移是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一,是机体正常生长发育的生理过程,也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移。检测细胞迁移能力的实验包括划痕实验和Transwell实验。 二、实验原理细胞划痕实验是简捷测定细胞迁移运动与修复能力的方法,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间是一种简单易行的检测细胞运动的方法,实验成本低,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。Transwell的基本原理是将transwell小室放入培养板中,小室内称为上室,培养板内称为下室,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,上室内添加上层培养液,下室内添加下层培养液。将细胞种在上室内,由于膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成...
产品名称: 细胞划痕
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时间: 2017 - 03 - 29
细胞划痕介绍:细胞划痕是一种简单易行的检测细胞运动的方法,实验成本低,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。 细胞划痕内容:材料:6 孔板(其他的也可以,但感觉6孔比较好,大小适中)、marker笔直尺、20微升枪头(灭菌)、无血清培养基、PBS步骤:能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。3.第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。4.用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。5.放入37度5%co2培养箱,培养。按0,6,12,24小时取样,拍照。 细胞划痕注意事项:一般做划痕实验,都是在无血清或者底血清状态下培养的,否则细胞增殖就不能忽略。按照6孔板背后画线的垂直方向划痕,可以形成若干交叉点,作为固定的检测点,这就解决了前后观察时位置不固定的问题。目前,基尔顿生物科技(上海)有限...
产品名称: 细胞增殖
型号:
时间: 2017 - 03 - 29
一、服务介绍细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。通过细胞分裂,可以将复制的遗传物质,平均地分配到两个子细胞中去。细胞增殖实验包括MTT法和CCK8法。二、服务流程1、细胞培养2、药物处理3、试剂处理4、测定吸光度5、撰写实验报告三、客户提供1、培养好的细胞(大于106)以及所需药品。2、药物作用方式(药物浓度、时间等)。四、交付内容实验报告:详细操作步骤、统计分析。五、服务列表项目周期MTT法5个工作日CCK8法5个工作日
型号:
时间: 2021 - 02 - 24
简介:10x Genomics 是基于微流控技术的单细胞系统,可同时获得100-800000个细胞的表达信息,实现对细胞群体的划分与细胞群体间基因表达差异的检测,是肿瘤细胞异质性、免疫细胞群体检测以及胚胎发育研究的黄金方法。10xGenomics单细胞应用广泛,可应用的细胞类型有:生殖细胞,胚胎细胞,神经细胞,免疫细胞,肿瘤细胞,干细胞,其他原代细胞。1  实验流程1.1实验流程图1.2实验描述1) 细胞质检RNA,用Countess®II Automated Cell Counter对细胞计数,将细胞浓度调整到理想浓度1×106/mL。2) 10x 标记cDNA 片段,含有barcode信息的凝胶珠子首先与细胞和酶的混合物结合,然后被位于微流体'双十字'连接中的油表面活性剂液滴包裹。液滴非常小,仅能容纳一个凝胶珠子,液滴流到储液器中被收集后,凝胶珠子溶解释放引物序列,逆转录cDNA 片段,并以cDNA 为模板进行PCR 扩增。将每个液滴中含有barcode信息的产物混合,构建测序文库。3) 建库,首先利用Biorupter 超声破碎仪将c...
产品名称: 外泌体技术服务
型号:
时间: 2021 - 02 - 24
服务介绍:外泌体是包含核酸和蛋白质的小囊泡(30-150 nm),是由各种各样的细胞分泌产生,在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。本产品是自主开发的外泌体快速提取试剂盒,经过优化处理适用于细胞培养上清液、血清、血浆、尿液和其他体液(脑脊液、腹水、羊水、乳液以及唾液等)中的外泌体提取,并搭配纯化过滤装置,可快速高效获得高纯度的外泌体颗粒。操作步骤示例:
产品名称: 明暗箱实验
型号:
时间: 2017 - 08 - 10
主动回避与被动回避回避实验是利用动物的好暗避光(明暗穿梭)、对厌恶刺激(如足电击)的恐惧和记忆而建立起来的。所以对实验者(而不是对动物)而言,回避实验在技术上与暗示关联条件恐惧相类似。所用的刺激为温和的足电击,发生的反应是动物逃避曾经受到电击刺激的地方。根据动物的逃避方式分为主动回避和被动回避(active and passive avoidance)。前者要求动物主动从有厌恶刺激的箱中逃离;后者则要求动物遏制自己而不进入有厌恶刺激的箱。根据所用 仪器 设备的不同又可分为穿梭回避、跳台回避、Y-形迷宫回避。这里主要介绍前两种回避。一、 实验设备(一)穿梭回避实验设备 包括穿梭箱、刺激控制器和计算机。这里介绍美国Med Associates公司生产的ENV-010MC穿梭箱。它包括左右两个同等大小(20.3cm*15.9cm*21.3cm)的隔室(compartment)。其中一隔室用一黑色布套包裹,形成暗箱(主动回避可不用暗箱)。两隔室之间由一个拱形门(8.9cm*11.4cm)相联,门可由实验者根据实验需要关上或打开。隔室地板为不锈钢栅栏(直径:大鼠4.8mm,小鼠3.175mm)。...
产品名称: 自发活动实验
型号:
时间: 2017 - 08 - 10
实验方法原理: 自发活动是正常动物的生理特征。自发活动的多少往往能反映中枢兴奋或抑制作用状态。镇静催眠药地西泮(安定)等中枢抑制药均可明显减少小鼠的自发活动;而中枢兴奋药咖啡因等则可增加小鼠的自发活动。小鼠自发活动增减的程度与中枢兴奋药或抑制药的作用强度成正比。 实验材料:白鼠 、试剂、试剂盒、苯甲酸钠***溶液 仪器、耗材、钟罩、注射器、天平 实验步骤 一、方法: 取小白鼠2 只,称体重,分别放入两个钟罩内。待小鼠安静后,分别进行腹腔注射,一只1%苯甲酸钠***溶液150 mg∕Kg,另一只0.5%安定溶液20 mg∕Kg。给药10分钟后,观察两只小鼠的活动,比较有何不同。 注意事项 ⒈  小白鼠应尽量选取活泼者,同性。 ⒉  实验前禁食禁水24 h。 ⒊  实验建议在20 ℃以上室温下进行,室温过低常影响小白鼠活动。 ⒋  实验建议在上午做,以为小白鼠的活动通常在中午及下午减少。 ⒌  观察内容如走动、站立、嗅、理毛、舔、撕咬、平衡失调、竖尾等。
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