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PCR污染的监测

日期: 2017-07-11
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一个好的实验室,要时刻注意污染的监测,考虑有无污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。

1.阳性对照:在建立PCR实验反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照,它是PCR 反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性对照要选择扩增度中等、重复性好,经各种鉴定是该产物的标本,如以重组质粒为阳性对照,其含量宜低不宜高(100个拷贝以下)。但阳性对照尤其是重组质粒及高浓度阳性标本,其对检测或扩增样品污染的可能性很大。因而当某一PCR实验试剂经自己使用稳定,检验人员心中有数时,在以后的实验中可免设阳性对照。

2.阴性对照:每次PCR实验务必做阴性对照。它包括

(1)标本对照:被检的标本是血清就用鉴定后的正常血清作对照;被检的标本是组织细胞就用相应的组织细胞作对照。

(2)试剂对照:在PCR实验试剂中不加模板DNA或RNA,进行PCR扩增,以监测。

 

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