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transwell常见问题

日期: 2017-07-14
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1、什么是transwell,可以用来做哪方面的实验?

A:Trans-这个词根有转移、转运、穿过的意思,well有小室的意思,可以从字面上理解,这是一类有通透性的杯状的装置,可以认为这是一种膜滤器(Membrane filters),也可认为是一种有通透性的支架(permeable supports)。transwell侵袭实验,原理简单地说,就是用一特殊的膜将高营养的培养液和低营养的培养液分离开,细胞放在低营养的培养液里,为了找吃的,细胞会往高营养的培养液里面跑,但是由于有膜阻隔着,因此要穿过膜过去才行。我们在膜上涂上一层基质胶,模仿细胞外基质,细胞需须把基质消化了才能够从低营养的培养液进入到高营养的培养液里面,最后我们通过检测高营养的培养液里细胞量就可以了解细胞的侵袭能力。

应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。当然不同细胞其体积不同,具体选择时要考虑到细胞大小。常用的实验有(1)共培养体系;(2)趋化性实验;(3)肿瘤细胞迁移实验;(4)肿瘤细胞侵袭实验常用8.0、12.0µm膜,原理与肿瘤细胞迁移实验类似。

 

如何选择transwell体系?

A:transwell体系的选择需要根据所要进行的实验的目的来判断的,选择的项目主要包括(1)膜;(2)孔径;(3)孔板大小。根据Corning公司的transwell体系,现总结经验如下:

 (1)transwell膜的选择:Transwell通透性支持物可以提供一下三种膜材料:聚碳酯(PC),聚酯(PET)和胶原包被的聚四氟乙烯(PTFE)。

 a:聚酯Transwell-透明嵌套的特点是带有在显微镜下呈透明的膜。这些膜经过处理,可以让细胞更好的贴附和生长。 Transwell-透明嵌套使细胞在相差显微镜下更易观察,可以估计细胞的生长状态和单层细胞的形成。
 b:聚碳酯Transwell嵌套提供从0.1um到12.0um多种孔径。所有的膜都经过处理,使得细胞更易贴附。Transwell-COL嵌套湿润时透明的,胶原包被的PTFE膜,使得细胞更易贴附和伸展,同时在培养的过程中可以观察。

 c: Transwell-COL含有牛胎盘中提取的等摩尔数混合I型和III型胶原。不同于传统包被技术会形成密封的膜层康宁专利包被技术使具有生物稳定性的胶原包裹住滤膜的每一根纤维,从而保持了膜的多孔性

 

 

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