服务电话: 400-9631-028
基尔顿生物科技 JRDUN BIOTECHNOLOGY
思想留给科学,实验外包出去
新闻动态
科研行业的发展方向
 
新闻中心 News
1)实验条件优不佳:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸蛋白多糖。3) 细胞状态及融合度:长势旺盛的细胞转染效果更佳,细胞密度应该在转染时融合度至少70%以上。4)DNA纯度及数量:确保质粒OD值A260/A280 在1.8~2.0之间。DNA量不能太高,单独DNA也会对细胞生长有一个基础的影响。课题设计、基金申请、文章润色、实验外包  基尔顿生物欢迎您的咨询!
发布时间: 2019 - 07 - 05
浏览次数:11
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例1.提前1天细胞种植悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。2.转染过程取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μl。注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。取1ul的EntransterTM-R4000,然后加入24ul无血清稀释液体,充分混匀,制成EntransterTM-R4000稀释液,终体积为25μl。室温静置5分钟。将EntransterTM-R4000稀释液和RNA稀释液充分混合(可用振荡器振荡或用加样器吹吸10次以上)混合,室温静置15分钟。转染复合物制备完成。将50μl转染复合物滴加到有0.45ml全培养基(可含10%血清和抗生素)的细胞上,前后移动培养皿,混合均匀。注意:对本试剂,采用含血清的全培养基有助于提升转染效率。转染后6小时观察细胞状态,如状态良好可不必更换培养基,继续培养24-96小时得到结果。注意:1.siRNA转染后,继续培养24-72小时在mRNA水平得到结果,继续培养24-96小时在蛋白水平得到结果。mRNA转染后,根据需要在24小时后得到结果。2.在部分实验室,...
发布时间: 2019 - 07 - 04
浏览次数:9
阿尔茨海默病(AD)是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病。以往使用C57BL/6J (“B6”)小鼠制备基因修饰模型,为阐明基因功能做出了重大贡献。但是对于阿尔茨海默氏病这种慢性复杂性疾病,纯系小鼠不是很好的模型,这可能导致无法将研究结果从小鼠转化到临床的原因之一。野生小鼠品系表现更多的遗传多样性,所以能更好的模拟在阿尔茨海默氏症基因效应,可以成为与人类相似的多样性更好的模型。美国杰克逊实验室(JAX)副教授Gareth Howell团队在PLOS Genetics报道,将阿尔茨海默病相关基因广泛使用的APPswe和PS1de9 (APP/PS1) B6小鼠,与三种野生小鼠品系CAST/EiJ、WSB/EiJ和PWK/PhJ进行杂交制备了新的转基因鼠。这些野生小鼠背景的模型可以表现出阿尔茨海默氏症基因和生理相关的风险因素的变异,与人类患者群体表现相似。携带早发性阿尔茨海默氏症突变的野生小鼠,在认知能力、神经退行性变和斑块负荷在内的一系列阿尔茨海默氏症特征性表型,表现出品系、性别和基因型的差异。另外还观察到伴有血管渗漏脑淀粉样血管病,提示其中一个品系可能是一种新的混合病理模型。进一步分析发现,与阿尔茨海默氏病易感性相关的大脑免疫反应相关的基因在不同的野生小鼠品系中的表达也有显著不同。野生型小鼠在髓系细胞(对斑块起反应的免疫细胞)的表达和数量上表现出特异性的差异。在阿尔茨海默...
发布时间: 2019 - 07 - 04
浏览次数:3
  • 扫码关注
    扫码关注
    扫码关注
基尔顿生物科技(上海)有限公司    版权所有
客服电话:021-55130726邮箱:jierdun@jrdbio.com
地址:上海市长江南路180号长江软件园B区B638室

X
3

SKYPE 设置

4

阿里旺旺设置

5

电话号码管理

  • 400-9631-028
  • 18017844061
6

二维码管理

展开