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实验步骤:1.在进行动物造模的实验之前,首先要将进行试验的小鼠禁食,zui好是禁食12个小时左右,然后使用注射溶液进行麻醉,其中溶液的配合比是百分之十的水合氯醛溶液按照0.004毫升每克的数量输入到小鼠的体内,并且进行腹腔的麻醉,在进行麻醉之前就将编织线还有结扎以及阻断动脉的线准备好,并且在生理盐水中进行浸润。2.等到一定的时间以后,在检查看看小鼠的状态,如果小鼠不能够自由翻身的话,那么就说明已经达到了麻醉的要求,这个时候将小鼠绑在解剖台上面,并且在脖子以下的地方使用棉签进行垫高,并且实用碘来进行消毒,随后准备备皮。3.使用工具在小鼠的脖子的正中间的位置将皮肤剪开,然后使用眼科专用的弯镊子和眼科的直镊子进行分别和皮下组织以及脂肪的分离,然后将浅机模和颈阔肌分割以后,颈深肌就会暴露出来,同时暴露出来的还有气管前肌。4.在持续分离的过程中,将气管前肌分离以后,从小数的额右侧锁乳突肌前面的位置将颈深肌膜死开以后,然后将颈动脉鞘暴露出来,这个时候要将小鼠的气管部分进行压迫,并且将颈动脉鞘花开,进行穿线并且打上活结这样能够阻断小鼠的血液的流通,但是要注意的是不能够伤害动脉神经鞘的颈内静脉和迷走神经,如果不小心伤害到的话,很有可能会引起来小鼠的呼吸骤停。5.这个时候沿着颈总动脉向上分离,并且在甲状软骨的上面的部分将颈外动脉分离出来,并且还要在靠近器官的地方进行操作。6.在颈外动脉起始前的地方进...
发布时间: 2018 - 12 - 14
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(1) CC1诱导方式选取40%CC1溶液,按照每千克两毫升的剂量,对大鼠腹腔内进行注射,每周连续性注射两次,一共注射八周,可以将大鼠内部肝纤维化模型成功复制。CC1溶液是氯化烷类的相关化合物,他会有选择性的损害动物内部的肝脏,对于动物内部的肾脏产生直接影响,同时当它进入到动物体内之后,可以直接进入到肝脏细胞,溶解肝脏细胞上膜成分。也可以成功进入,体内对肝细胞色素进行沉淀,混合性产生代谢,生成甲基自由基,启动过氧化作用,导致整个肝细胞损伤坏死,长期进行复制,可以诱导肝纤维化形成,这是一种目前为止,在医学范围内应用zui为典型的动物怎么方法。整个方法造模价格十分便宜,方式简单,造模时间较短,对于研究肝纤维化病变具有可靠性,目前为止,这种动物造模研究已被应用于肝纤维化细胞分子治疗中,但该模型有待进一步探讨。(2) 半乳糖胺诱导方式选取半乳糖胺以每千克500毫克的剂量注射到大鼠体内,每隔一天注射一次,连续性的注射12周。可以复制肝纤维化模型。 半乳糖胺能够导致肝脏损伤,他主要的原理是干扰肝脏内部核苷酸以及蛋白质合成,造成肝脏内部毒素血症,产生氧自由基以及过氧导致的干膜障碍。能够损伤线粒体。这种方法操作相对简单,时间耗费适中,具有高度复制性,适合保护肝脏的动物,目前,这种方式可以研究脂肪肝以及肝纤维化的相关临床医学研究。可以研究动物造模有效发病方式,以及它们之间的关系。(3) 乙...
发布时间: 2018 - 12 - 13
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组织石蜡包埋切片实验步骤1、取材:新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-二甲苯I 5-10min-二甲苯II 5-10min-蜡I 1h-蜡II 1h-蜡III 1h。3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。4、切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4μm。 切片漂浮于摊片机40℃ 温水上将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃ 烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。 实验注意事项:1、固定剂应有足够的量,一般为组织块体积的10∽15倍。2、根据组织的不同和实验目的的不同,选取不同的固定剂。3、固定时间依材料大小、固定剂种类而异,可从1小时到几时小时,有时中间需要更新固定剂。某些固定剂对组织的硬化作用较强,作用时间应严加控制,不能过长。4、取材切面要平整,厚度不易超过2mm,否则脱水效果不能保证...
发布时间: 2018 - 12 - 11
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