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(1)复制方法  主要采用基因敲除和转基因技术进行模型的复制。(2)模型特点1)Tottere小鼠(tg/tg系)模型:tg/tg为研究最多的遗传性癫癎间模型之一,除共济失调外,主要表现为失神样发作及双侧同步性6-7Hz棘波与多棘慢波。发作出现于4周龄左右,其易感性被认为与脑内去甲肾上腺素能的过度支配有关。新近发现,该型小鼠存在编码α1亚单位钙通道的基因突变,并认为与其发作易感性有关。本模型可用于基因突变致癫癎机制的研究。2)基因敲除和转基因小鼠模型:第一个纯合子小鼠模型是进行肌阵挛癫癎(PME)综合征模型,即Cystatin B基因敲除小鼠模型。Cystatin B基因编码一种Cystatin蛋白激酶的抑制剂-Cystatin B,基因敲除则Cystatin B不能表达,而 U-L型PME患者均有此基因的突变及功能缺失。Cystatin敲除小鼠与U-L型PME患者的神经表型有特殊的重叠。中枢神经系统的离子通道病与人类癫癎有关,如Sharker型延迟整流钾通道基因敲除小鼠模型,出现严重的强直-阵挛发作,易导致早期死亡。转基因Q54小鼠模型,Q54小鼠的癫癎发作始于2月龄时,伴有行为受限及呆板重复动作,连续脑电图监测发现海马有局限性癫癎活动,甚至扩展至皮层也有癫癎活动,病理检查发现海马CA1~3区及门区有大量的细胞脱失及胶质增生。转基因(Q54小鼠提供了一个遗传学模型,在此...
发布时间: 2019 - 08 - 02
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(1)复制方法  实验装置是由双层有机玻璃圆筒制成的听源性发作仪,其外筒直径为50cm,高65cm,内筒可以自由移动,直径为35cm,高65cm。仪器上方装有110~120dB的高音电铃,供刺激用,下有一自由开关小门,供取放动物用。选用成年P77-PMC大鼠,雌雄均可。实验前12h禁食不禁水,将其放入听源性发作仪内,连续给予60s的铃声刺激,每天一次,连续3d。动物每天应在固定的时间以相同条件刺激,反应恒定者用于实验。(2)模型特点  听源性敏感动物在受到强铃声刺激时,产生的一种典型的运动性发作。其发作可分为四种类型:奔跑Ⅰ型(动物在60s的铃声刺激期间只奔跑1次,不发生惊厥);奔跑Ⅱ型(具有奔跑期和静止期,直到停止刺激为止,也不发生惊厥);惊厥Ⅰ型(动物只奔跑1次,随后出现阵挛性惊厥);惊厥Ⅱ型(奔跑2次,惊厥1次)。给药后,在一定时间内再测其反应强度。听源性发作的始发部位在脑干或中脑,但脑组织无任何器质性病变,而在不刺激情况下,其行为与听源性发作不敏感的正常鼠无任何区别。(3)比较医学  听源性发作与人类之光敏性和强直一阵挛发作近似,均具有遗传性,是研究抗癫癎药物和原发性癫癎发病原理常用的病理模型。课题设计、基金申请、文章润色、实验外包  基尔顿生物欢迎您的咨询!
发布时间: 2019 - 08 - 01
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一、环境因素无菌环境无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内,解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵,但细胞在体外培养的过程中,缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖,必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。常见的微生物污染有支原体、细菌、真菌。支原体无致死毒性,可与细胞长期共存,对细胞有潜在影响,但体积小,不易鉴别,可借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行检测。细菌增殖快,在短时间内即可大量扩增,并产生毒素杀死细胞。真菌的种类繁多,肉眼可见,漂浮于培养液面上,可呈丝状、管状或树枝状等。合适的温度一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37~38,不适宜的环境温度会影响细胞的生长。细胞对低温的耐受能力要强于对高温的耐受能力,在低温下,细胞的代谢活力及核分裂能力降低。若温度不低于0,虽然细胞代谢受到影响,但无损伤作用;25~35时,细胞以缓慢的速度生长;但若被置于40数小时,则不仅不利于细胞生存、生长,甚至可导致其死亡。适宜的渗透压高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。因此,渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。多数体外培养的细胞对渗透压都有一定的耐受能力,实际应用中,260~320mmol/L的渗透压可适用于大多数细胞。气体环境与pH细胞的体外培养...
发布时间: 2019 - 07 - 31
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