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第一类是染料法引物主要是SYBR Green为代表的非饱和染料,和LC Green为代表的饱和型染料。这类染料,你可以理解为和EB发荧光的原理差不多。就是插入双链后,就能发出荧光。第二类是水解型的探针Taqman的探针或者Taqman-MGB的探针。主要就是利用聚合酶的5’-3’外切酶活性,把挡在扩增道路上的探针水解掉,水解后荧光基团就和淬灭基团分离开了,这样就能产生荧光,MGB呢,是一种淬灭基团,但是可以提高探针的退火温度,缩短探针的长度,不过成本会贵一倍多。而且是有专利的一般的引物合成公司是不能合成的。不过普遍来说Taqman探针都要比染料法qPCR成本要高。第三类是杂交型的探针这类探针包括了Beacon(分子信标),FRET(能量共振转移),其实芯片也算是杂交型的探针,但这里我们就暂时不讲芯片了。Beacon是茎环结构的探针,在杂交后,探针的茎部打开,结合到产物上,打开后的荧光基团会和淬灭基团分开,产生荧光。由于Beacon的探针部分退火温度发生变化就不会产生荧光,所以一般会用来检测DNA的突变,但探针超难设计,所以用的人也不多。FRET也是一种杂交探针,这个挺复杂,用的是能量的转移,这需要两个探针来完成,前部的探针的3’末端结合一个荧光基团,后部探针的5’末端结合另一个荧光基团,第一个荧光基团的发射光就是第二个荧光基团的激发光,也就是你点了亮第一个荧光基团的话,第二个荧光基...
发布时间: 2018 - 08 - 15
浏览次数:56
在科研的这条路上,医生们遇到的问题也很多,比如临床科研两头抓力不从心、课题申报受限、申报流程不透明、课题经费使用不灵活等都不同程度地束缚了医生的手脚。医生做科研,从医院角度讲,能够促进学科建设,为医院可持续发展提供基础和动力;从个人角度讲,提高分析问题、解决问题的能力,可以改变临床医生的思维,最终提高临床诊疗水平。课题申请的过程中,从课题设计到标书成立,再从撰写申请到获得资助,可以说是“大浪淘沙挑金子”,需要不少时间和精力。而临床工作者在做科研的同时更要兼顾临床工作,面对交付在手中的生命,细心和责任心必不可缺。主任A认为,“如果因精力不够而放弃申请科研课题,那么医生连做科研‘分母’的资格都没有,更别说做‘分子’了。参与是首要条件,有参与才有可能被认可”。“论科研深度,临床医生肯定比不过科研人员。”主任A表示,他所理解的医生做科研,是以临床中出现的疾病为出发点,从一线医生的角度,发现问题并尝试解决问题。“科研能让医生插上梦想的翅膀。”课题设计、基金申请、文章润色、实验外包  基尔顿生物欢迎您的咨询!
发布时间: 2018 - 08 - 09
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Tunel染色实验TUNEL(TdT-mediated DUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端,用荧光显微镜即可观察结果。在此基础上接辣根过氧化物酶标记的荧光素抗体,可进一步放大检测信号,可在普通显微镜下观察实验结果。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂,因而没有3’-OH形成,很少能够被染色。本公司可做Tunel染色有石蜡切片Tunel染色(普通和荧光)、冰冻切片Tunel染色(普通和荧光)以及细胞爬片Tunel染色(普通和荧光)。Tunel染色实验结果:课题设计、基金申请、文章润色、实验外包 基尔顿生物欢迎您的咨询!
发布时间: 2018 - 08 - 07
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