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1.收到细胞,第一时间要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如293T,平时贴壁就不是很牢,在装满的培养基瓶子里面,会发生大片的脱落,细胞聚集在一起,但是细胞生长还是正常的,通过离心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的贴壁生长。2.当通过上一步的观察,细胞初步没有任何问题时,进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时,则处理如下:弃除瓶中大部分培养基,仅保留5到10mL培养所需的常规培养基;或更换新鲜的培养基,置于培养箱中,随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下,会调整为静止期,或者慢速生长期,必须恢复37度的环境至少3个小时左右,才能重新调整到接近对数生长期的状态,在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率,和细胞的存活率。3.如果经第一步观察发现细胞密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快,状态稳定,不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶;对于生长较慢,细胞比较薄,状态容易波动的细胞类型,一次少传些,保证每瓶细胞密度大些,便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞,第一次处理也可以依照第二种情况。传代...
发布时间: 2018 - 08 - 27
浏览次数:27
(一)青蛙与蟾蜍两者均属于两栖纲,无尾目。蟾蜍和青蛙是教学实验中常用的小动物。其心脏在离体情况下仍可有节奏地搏动很久,可用于心功能方面的实验。蛙舌与肠系膜是观察炎症和微循环变化的良好标本。此外,蛙类还能用于水肿和肾功能不全的实验。(二)小白鼠属于哺乳纲,啮齿目,鼠科。其繁殖周期短、产仔多、生长快,饲料消耗少,温顺易捉,操作方便,又能复制出多种疾病模型,是药学实验中用途最广泛和最常用的动物。(三)大白鼠亦属鼠科。性情不像小白鼠温顺。受惊时表现凶恶,易咬人。雄性大白鼠间常发生殴斗和咬伤。具有小白鼠的其他优点,故在药学实验中的用量仅次于小白鼠。(四)豚鼠豚鼠又名天竺鼠、荷兰猪。原产于欧洲中部。属于哺乳纲,啮齿目,豚鼠科。性情温顺,胆小。不咬人也不抓人。豚鼠可分为短毛、长毛和刚毛3种。短毛种豚鼠的毛色光亮而紧贴身,生长迅速,抵抗力强,可用于实验。其余两种对疾病非常敏感,不宜用于实验。(五)家兔家兔属于哺乳纲,啮齿目,兔科,为草食哺乳动物。家兔性情温顺、怯懦、惊疑、胆小,是常用的实验动物。家兔品种很多,在实验室中常用的有:(1)青紫蓝兔:体质强壮,适应性强,易于饲养,生长较快。(2)中国本兔(白家兔):抵抗力不如青紫蓝兔强。(3)新西兰白兔:是近年来引进的大型优良品种,成熟兔体重在4~5.5kg。(4)大耳白兔:耳朵长大,血管清晰,皮肤白色,但抵抗力较差。(六)狗狗属于哺乳纲,食肉目,犬科。...
发布时间: 2018 - 08 - 22
浏览次数:20
1、引入。要写第一句话,先思考文章的主题是什么?用一种读者能理解的方式来表达。如果你正在写博士论文,你的读者是评审官——假设他们熟悉普遍的研究领域,所以你需要明确地告诉他们你的论文主题是什么。同样的建议也适用于科学论文——读者一开始是同行评审者,而最终是要让你所在领域的其他人对你的研究感兴趣,所以他们当然也知道研究背景,但更想知道你的论文主题的亮点是什么。2、陈述你研究的问题。关键的研究问题是什么?同样,用一个句子表达。记住,你的第一句话介绍了整个主题,所以现在你可以在这个问题上继续讨论,集中在那个主题中的一个关键问题上。如果你不能在一个关键问题上总结你的论文,那么你还不明白你想写什么。在这个步骤中继续思考,直到你可以总结出一个单一的、简明的、并且可以被理解的关键性问题。3、用一句话总结为什么至今还没有人能充分的回答/解决你研究的问题。对于一篇博士论文,你将会用一整章来综述之前文献中所做的大量工作。但在科技论文中,你要把它浓缩成一句话。但要记住,关键是不要列举人们尝试失败的各种方式,重点是要去说明有一种方法是其他人都没有尝试过的,而这正是你的研究所做的事情。然而,在这里你需要用一种清晰、直观的方式来表达出这个问题是过往的文献中的一个空白点。所以,考虑用 “previous work has failed to address…” 这样的短语。4、用一句话来解释你是如何解决这个研究问...
发布时间: 2018 - 08 - 17
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