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细胞划痕实验是简单经济研究细胞迁移的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。一. 实验准备(1) 直尺和marker笔在操作前在超净台内紫外照射30min。(2) 胰酶,细胞培养基。(3) 细胞培养六孔板。二.实验步骤1细胞分盘通过胰酶消化细胞3分钟,加入培养基终止消化反应。然后轻轻吹打混匀细胞,将细胞均匀种于六孔版。将细胞置于含5%CO2的37℃温箱中孵育8-24h。细胞数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。注意:可以先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀划一条横线,大约每隔0.5~1cm一道,可以画穿孔的直径,也可以画井字(可选步骤);手动划痕,不能每次划痕的一致,或者进行划痕时会对边缘的细胞造成机械损伤,因此可以选择使用划痕插件。2划线第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。细胞划痕重要的是线尽量画直,且实验组和对照组细胞宽度相近,实验组和对照组可比性。3冲洗细胞用PBS轻轻洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。4培养、拍照放入37度5%CO2培养箱,培养。按0, 12,24小时取样,拍照。拍照时“划痕”的方向好在视野内为水平的或者垂直的。课题设计、基金申请、文章润色、实验外包  基尔顿生物欢迎您...
发布时间: 2018 - 11 - 15
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一、动物造模实验前的准备工作要充分。 在做实验前应该实验室的卫生问题,尤其是在研究某一种菌体的时候更需要不会存在破坏实验的因素存在,并且提前摆放好所需要用到的物品。而需要用到的动物造模也要提前处理好,在做实验的时候再将其进一步处理,不影响实验判断。二、动物造模前动物的种类应该提前确定好。 实验者提前将自己需要做的实验以各种方式寻找资料,通过自己准备的资料来确认哪一种动物比较适合这个实验。  三、动物造模实验中的注意事项。 在实验的过程中为了能有的对比性,实验者需要将未进行实验的动物做一个观察总结,并且实验的过程中加入了需要研究的药剂之后要及时记下随笔,并且在结束后动物的状态也需要登记起来。为了给实验一个比较明显的对比,造模前和造模后都需要给药,实验的对比效果才会比较明显。尤其使学生在学习某一方面的知识,更需要一个详细的数据才可以更有效地分析实验中的结论。四、动物造模实验后需要注意的一些事情。 在实验结束后实验者应该将实验室的清洁工作做好,比如研究肾脏方面的实验中就有可能会存在一些影响到身体的病菌,避免细菌在实验者走后继续繁殖,影响整个实验室的环境,对下一次的研究也会造成影响。课题设计、基金申请、文章润色、实验外包  基尔顿生物欢迎您的咨询!
发布时间: 2018 - 11 - 13
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实验进行前,超净台用紫外灯照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超净台台面,并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内;实验用品用完应移出超净台,以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞;即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基,避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品,避免污染。勿碰触吸管尖头,不小心碰触后应立即更换;不要在打开的容器瓶口正上方操作,容器打开后,倾斜45°操作,操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方,应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次,用双蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水(应每周更换),待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。课题设计、基金申请、文章润色、实验外包  基尔顿生物欢迎您的咨询!
发布时间: 2018 - 11 - 12
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