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做细胞实验,细胞铺板大概是最常见的一个实验了。但是有很多人不是很得要领,铺得不是均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶。以下是我的一些技巧,希望可以帮助到大家。1.一般96孔板我每孔是加100微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入,加完半边板后,将未加的细胞悬液混一下再,继续加剩余的半边板子,都加完后盖上盖子,左手轻轻扶住板的左边,右手轻轻敲击板的右边缘,注意把握力度(我一般轻巧敲三下),太强或次数太多会导致细胞集中成堆,将板顺时针旋转(逆时针效果不好),依次敲击剩余三个边,静置约5分钟,放入37度培养箱。6孔板12孔板或24孔板,我均采用将第一个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔一次类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多,而加在周边晃匀后周边细胞多中间少的现象,细胞分散较均匀,注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢,但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式,但力度没有96孔板好掌握,效果没有96孔板好,所以我放弃改用浸润孔底的方法。2. 细胞实验中细胞悬液加完后,将细胞培养板抬高,对着灯光,从底部往上看,看细胞有没有抱团。然后从底部敲击,使之分散。3.如果实验室有平板振荡器的话,我建议用这个仪器稍振荡一下,效果不错,就是振幅小,频率高的那种。4....
发布时间: 2017 - 06 - 06
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骨质疏松症是一种以骨量减少、骨组织微结构异常为特征,致使骨骼脆性增加、极易发生骨折的一种全身性代谢性骨骼系统疾病。其所引发的骨折一方面给患病家庭带来严重的经济负担,另一方面也给患者带来了疼痛、不便,甚至带来了一定的致残率和致死率。所以,当下探索骨质疏松动物模型为研究骨质疏松发病机制及其预防和治疗这一使命至关重要。研究方法有:手术法、药物法、营养法、制动法、联合造模法、基因法等。综上所述,理想骨质疏松症动物模型的病变过程、病理转变及转归等应与人类骨质疏松症症状尽可能的相似。同时,在骨质疏松症的发病机制和预防治疗上,可结合中医在疾病上的整体观念进行全面、多靶点的探索,以求对骨质疏松症更全面深刻的认识。近年来,随着对骨质疏松症的不断研究,新的动物模型将会不断出现,研究者应该根据自身的研究目的,采取相应的动物模型,为骨质疏松症的预防与治疗做出更大的贡献。
发布时间: 2017 - 06 - 05
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预防是防止细胞培养过程中发生污染的最好办法。只有预防工作做在前,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:1、添加抗生素2、从物品、用品消毒灭菌着手细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在无菌试验阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌。  3、从操作者做起(1)进无菌室前要用肥皂洗手,按规定穿隔离衣。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。(2)操作者动作要轻,必须在火焰周围无菌区内打开瓶口,并将瓶口转动烧灼。操作时尽量不要谈话,若打喷嚏或咳嗽应转向背面。(3)操作时要常更换吸管,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去。实验完毕用消毒水浸泡的纱布擦台面。4、防止细胞交叉污染(1)在进行多种细胞培养操作时,所用器具要严格区分。 (2)在进行换液或传代操作时,注射器和滴管不要触及细胞培养瓶瓶口,以免把细胞带到培养液中污染其他细胞。  (3)细胞一旦购置或从别处引入,均应及早留种冻存,一旦发生污染可重新复苏培养。5、无菌室的彻底消毒 (1)0.1%新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室;(2)甲醛熏蒸法:甲醛是一种广谱灭菌剂菌,其水溶液和气休对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。(3)细胞培养,首先要避免污染,但在细胞培养过程中,有了污染用适当的方法清除,这样也可以保证细胞培养的成功。
发布时间: 2017 - 06 - 05
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