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甲基化在研究基因的调控和肿瘤的发生过程中有着非常重要的作用。一般在正常的细胞中,基因调控区CpG均处于非甲基化状态。而当细胞一旦发生癌变后,这些CG区域往往会呈现出甲基化状态。英国医学刊物《the Lancet》曾报道过,奥地利因斯布鲁克医学院的专家们通过检测大便中DNA的甲基化状态变化,将健康人的大便与结肠癌患者的大便区分开来。大便标本中SFRP2 甲基化的程度是诊断结肠癌最可靠的指标。研究人员发现,肿瘤的发生以及一些遗传病的出现和基因甲基化有非常密切的关系。目前DNA甲基化研究是肿瘤分子生物学研究的一个重要分支。    Pyrosequencing技术作为一种新的序列分析技术,能够快速地检测出DNA分子中甲基化的频率,对样品中甲基化位点进行定性及定量检测,可以为甲基化研究提供了新的手段。Pyrosequencing通过合成的方法进行DNA序列DE 分析。它通过核苷酸和模板结合后释放 出的焦磷酸引发酶级联反应,激发荧光素发光。这项技术曾经被用于单核苷酸多态性(SNP)的基因型和单倍型检测,以及细菌和病毒的鉴定和分型研究。这项技术在Pyrogarm™软件上显示的峰值高度均为来自于序列分析的原始数据,通过峰值的高度可以精确的检测出混合DNA模板中等位基因出现的频率。通过Pyrosequcing系统可以获得以下结果:1发生甲基化的DNA序列位点;2 每个位点甲基化程...
发布时间: 2017 - 06 - 14
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人源抗体是指直接从人体血液分离获得B细胞,提取抗体的重轻链基因后,重组表达产生的抗体。   人源化抗体是指将免疫原免疫动物后,提取分离B细胞,通过细胞融合或者直接基因重组的方式,获得特异性识别目的蛋白的抗体后,在通过进一步的基因重组,将编码该抗体的重轻链基因中可以替换的序列全部换成人源的序列,只保留抗原识别位点,所以最终的基因其实是个嵌合体。   两者的主要区别是,前者完全是人源序列,而后者还有少量免疫动物的序列;前者的抗体是自然产生的,没有经过反复免疫加强,亲和力和特异性方面会略差一些,而后者人源化抗体是经过反复免疫加强、筛选获得的,具有高亲和力、高特异性的特点,对相应实验接下去的应用会有比较强的优势。   目前,上海基尔顿生物,主营实验技术服务,如想了解细胞实验的更多内容,欢迎来电咨询18017844061
发布时间: 2017 - 06 - 14
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伤口愈合实验是研究体外研究细胞迁移的一个十分有效的的方法。原理是在铺板的单层细胞中设置一个无细胞的空白地带,然后对这个空白地带的边缘附近的细胞进行观察;这些边缘的细胞会慢慢的开始进行迁移,直至覆盖整个无细胞的区域,与别的细胞覆盖的区域重新互相接触在一起。传统实验方法     细胞在培养皿内贴壁后,使用移液枪的枪头在贴壁细胞的中间划过,造成一道伤口(划痕),之后的一段时间定时测量划痕的宽度,获得伤口愈合的细胞迁移数据。实验缺点:1.手动划痕,不能确保每次划痕的一致;2.划线不可避免会损伤少量细胞,对划痕的边缘的细胞造成机械损伤;3.若培养皿底部存在包被蛋白,划线很可能伤害到包被,影响到细胞迁移,很难判定对细胞迁移造成影响的因素。4.定时测量划痕的宽度,计算划痕宽度随时间推移的变化;在选取划痕测量点时,不可避免地引入了主观误差(人为选取了迁移结果符合实验预期的点); 综上考虑,传统的伤口愈合方法总是重复性不佳,对于实验结果的阐述说服力不足。 目前,上海基尔顿生物,主营实验技术服务,如想了解细胞迁移的更多内容,欢迎来电咨询:18017844061.
发布时间: 2017 - 06 - 12
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