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很多人对于动物造模这个概念并没有一个清晰的认识,通常我们说的动物造模技术并非单指做一个动物的模型,往往有更多的方面包含其中。 什么是动物造模技术简单的讲就是用各种动物当做实验对象,用来来模拟人体进行各项生命科学或医学研究。比如我们中学时曾经拿青蛙、鱼、蚯蚓或者猫做过一些简单的实验,现在一般在实验室里面用到比较多的实验动物就是小白鼠。  造模用途是什么?运用动物造模的实验内容是非常多的,具体的内容所研究的科研项目判定,比如说你想了解某一种因素作用在人类的身体会有什么影响或者造成什么样效果,就可以首先把这个因素作用在你要实验的动物身体,观察一下具体反应,以及实验周期结束以后实验动物的具体结果。比如小脑是支配我们人体平衡能力的一个中枢神经系统,如果想要验证这个理论,就可以对实验动物进行硬脑膜穿刺,损毁动物的小脑,观察到实验动物不能维持基本的平衡,这个过程就是一个动物造模。动物造模,通常都是使用常规操作,像注射,灌胃以及取血实验等,也会用小白鼠或者兔子进行一些腹部或者颈部的外科类操作,特别是对小鼠移植相应的肿瘤模型,其主要的目地就是为了更好的研究各种疾病的产生以及相关的治疗方法。动物造模的最终目地就是经过反复的试验后结果结论,获得认可。目前在我国从事动物造模的公司不胜枚举,但若能够提供专业的无菌动物实验室的话,就很少了,基尔顿生物拥有专业的团队,专业的技术,丰富的经验,...
发布时间: 2017 - 06 - 20
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小鼠肝细胞原代培养实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 小鼠肝细胞原代培养实验材料小鼠、试剂、试剂盒    DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS 仪器、耗材 饭盒纱布剪子镊子烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6孔培养板吸管移液管手套微量加样器 小鼠肝细胞原代培养实验步骤一、实验材料准备1.动物:小鼠。2.试剂:DMEM(含血清)、无血清DMEM培养基、胰酶、PBS。3.器械:饭盒、纱布、小剪子、小镊子、大镊子、大烧杯、平皿、研磨玻片、滤网、离心管(15/50 ml)、6孔培养板、吸管、移液管、手套、微量加样器。4.准备:酒精擦拭台面后把物品摆放好,开紫外线灯照30分钟后开鼓风机吹至实验结束。二、方法1.将小鼠断颈致死,置75%酒精泡2-3秒钟,取肝脏,置于盛有PBS的平皿中。2.剔除脂肪、结缔组织、血液等杂物,转移到另一个盛有PBS液的平皿中。3.用手术剪将脏器剪成小块(大小约1mm2),玻片研磨,转到离心管,离心(1 000 rpm,5 min)。4.视组织或细胞量加入5-6倍(3-5 ml)胰酶,37℃中消化20分钟,每隔5分钟振荡一次,或用吸管吹打一次,使细胞分离。5.加入3-5 ml含血清的培养液以中止胰酶消化作用。6.用100...
发布时间: 2017 - 06 - 19
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1.没有得到扩增产物 (1)酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。 (2)模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸,造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。 (3)变性温度是否准确:PCR仪指示温度与实际温度是否相符,过高酶在前几个循环就迅速失活;过低则模板变性不彻底。(4)反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶,应在未加Taq酶以前,将反应体系95℃加热5-10分钟。 (5)引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。(6)使用PCR试剂盒时还应注意:①是否严格按照说明书操作;②试剂使用前是否充分混匀;③试剂储存过久或不当而失效。 2.扩增产物在凝胶中涂布或成片状 (1)酶量过高。减少酶量;酶的质量差,调换另一来源的酶。(2)dNTP浓度过高。减少dNTP的浓度。 (3)MgCl2浓度过高。可适当降低其用量。 (4)循环次数过多;增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用二种温度的PCR循环。(5)退火温度过低。 (6)电泳体系有问题:①凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大;②凝胶没有凝固好;③琼脂糖质量差。 (7)若为PCR试剂盒则可能:①由于运输储存不当引起试剂盒失效; ②试剂盒本身质量有问题,如引物选择、循环参数等选择不当。 (8)降解的陈旧模板扩...
发布时间: 2017 - 06 - 19
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