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组织石蜡包埋切片实验步骤1、取材:新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-二甲苯I 5-10min-二甲苯II 5-10min-蜡I 1h-蜡II 1h-蜡III 1h。3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。4、切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4μm。 切片漂浮于摊片机40℃ 温水上将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃ 烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。 实验注意事项:1、固定剂应有足够的量,一般为组织块体积的10∽15倍。2、根据组织的不同和实验目的的不同,选取不同的固定剂。3、固定时间依材料大小、固定剂种类而异,可从1小时到几时小时,有时中间需要更新固定剂。某些固定剂对组织的硬化作用较强,作用时间应严加控制,不能过长。4、取材切面要平整,厚度不易超过2mm,否则脱水效果不能,&...
发布时间: 2018 - 12 - 11
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原代细胞培养是指细胞分离之后至初次传代之前的细胞培养阶段。原代细胞培养四个阶段:1.获取样品 2.分离组织3.解剖或解离组织块4.接种于培养器皿中培养原代细胞培养种类:1. 将组织块贴附于适宜的基质中,细胞可自组织块向外迁移生长。2. 将组织块用机械法或酶消化法处理后获得细胞悬液,接种细胞悬液,其中部分细胞黏附于基质生长。酶的种类:胰蛋白酶          胶原酶          弹性蛋白酶          链酶蛋白酶          裂解酶          脱氧核糖核酸酶          透明质酸酶这些酶即可单独使用,又可联合应用。原代细胞培养共同需要的条件:在取材时需去除脂肪和坏死组织;为减少对组织的损伤,需用锋利的器具;适度离心以去除用于解离的酶;由于原代培养组织细胞的存活率很低,原代培养的细胞密度应高于正常传代培养的细胞密度;营养丰富的培养基如Ham’s F12比简单的培养基(Eagle’s MEM)更可取。如添加血清,胎牛血清比牛或马的血清更好,细胞成活率更高。特殊...
发布时间: 2018 - 12 - 07
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实验外包体外实验:是指在体外使用从其通常的生物学环境中分离的生物体组分进行研究,例如微生物,细胞或生物分子。实验外包体外实验的实例包括:1、体外受精(经典案例)2、体外诊断:是指广泛的医学和兽医实验室测试,其用于使用从患者处获得的血液、细胞或其他组织的样品来诊断患者和监测患者的临床状态。3、细胞培养及药理实验等两者区别是反馈调节涉及的系统不同,体内试验由全身系统调控,体外试验只受所选系统调控。课题设计、基金申请、文章润色、实验外包  基尔顿生物欢迎您的咨询!
发布时间: 2018 - 12 - 06
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