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目的:探讨姜黄素预处理对沙漠干热环境中暑大鼠血液和组织中性粒细胞数量变化的影响。方法: 选取SPF级雄性SD大鼠160只,依据姜黄素灌胃剂量随机分为4组,各组连续等体积灌胃1周后,将大鼠置于西北 特殊环境人工实验舱,设定沙漠干热环境气候模式,分别在0min、50min、100min、150min时间点,各组随机取10 只出舱麻醉,测定血液中性粒细胞数;于150min时间点取各组大鼠回肠、肝、肾、肺组织,HE染色、镜下观察,记录 浸润的中性粒细胞数及组织病变。结果:各组的血液中性粒细胞在0min至50min时呈上升趋势;各组从50min 至150min血液中性粒细胞呈下降趋势。 第150min回肠、肝、肾、肺的中性粒浸润数随着姜黄素预处理浓度的增 加,均呈下降趋势,中、高浓度组中性粒细胞数明显低于低浓度组和盐水组(P结论:在干热环境持续暴露 下,大鼠血液中性粒细胞数呈现先升高后逐渐降低趋势;伴随着组织损伤的加重,组织浸润的中性粒细胞数呈上升 趋势,血液中性粒细胞的下降与组织中性粒浸润细胞的增加呈密切相关。 姜黄素可能通过抑制中暑大鼠血液中性 粒细胞的下降,减少组织中性粒细胞浸润来减轻组织损伤。课题设计、基金申请、文章润色、实验外包  基尔顿生物欢迎您的咨询!
发布时间: 2019 - 07 - 16
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细胞传代培养原理细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。二、材料和试剂1、细胞:贴壁细胞株2、试剂:0.25%胰酶、1640培养基(含10%小牛血清)3、仪器和器材:倒置显微镜,培养箱、培养瓶、吸管、废液缸等三、操作步骤1、将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。2、加入0.5—1ml 0.25%胰酶溶液,使瓶底细胞都浸入溶液中。3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置镜下观察细胞。随着时间的推移,原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时将胰酶弃去,加入10ml培养液终止消化。观察消化也可以用肉眼,当见到瓶底发白并出现细针孔空隙时终止消化。一般室温消化时间约为1—3分钟。4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液,分到另外两到三瓶中,实践培养液塞好橡皮塞,置37℃下继续培养。第二天观察贴壁生长情况。附:消化液配制方法:称取0.25克胰酶蛋白酶(活力为1:250),加入100ml无Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,滤器过滤除菌,4℃保存,用前可在37℃下回温。胰酶溶液中也可加入EDTA,使最终浓度达0.02%。无菌操作的注意事项:细胞原代培养一定要保持工作区的无菌清洁,先用紫外灯杀菌1h,操作前用...
发布时间: 2019 - 07 - 10
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一、试剂耗材:   小鼠(8-10周龄)、玻璃皿(用于解剖小鼠)、培养皿(塑料,DC在光滑的皿里转化的好,因此最好使用一次性的塑料培养皿)、剪刀、镊子、纱布、细胞培养液、GKN缓冲液、吸管、离心管(50ml、100ml用饭盒多装一些)、锡箔纸、1ml注射器。    细胞因子:GM-CSF、IL-4    高压灭菌:除锡箔纸、注射器,其他物品都需要高压灭菌。  二、实验步骤: 1.取下小鼠的四肢(后两肢最好),分离骨上附着的肌肉、血管、皮肤(用纱布反复的搓),完全暴露出骨及其附带关节,注意不要离断关节。将腿骨剪成三节即小腿骨、关节处、大腿骨; 2.用1ml注射器吸取GKN(1640也可以,但费用较高),冲洗骨髓至骨完全变白,吹入两个离心管,便于离心找平; 3.1000转5分钟离心,倒掉上清液,再用1640悬起再离心一次,倒掉上清液;4.加细胞培养液,将骨髓细胞重悬,一只小鼠大概分4个培养皿,重悬的细胞总量尽量保持4ml;5.细胞至于培养皿,补充培养基。即1ml细胞+4ml培养液;6.加入细胞因子,IL-4和GM-CSF以向DC转化。用锡箔纸包裹,避光放入培养箱,轻拿轻放不可摇晃; 7.第三天(之前不可拿出)等量加入培养基即4ml,并加入对应量的细...
发布时间: 2019 - 07 - 09
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