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(1)复制方法  体重200g左右的大鼠和体重500g左右的豚鼠,经检查动物外耳道清洁,鼓膜完整,无自发性眼震,听觉敏锐。①豚鼠用氟烷吸入麻醉后固定,采用化学法破坏其一侧迷路,无菌手术切开颞区皮肤并暴露鼓室泡骨壁,用手术刀尖钻开直径约0.5mm的小孔,经此孔将0.1耐氯仿注入中耳腔,也可经鼓膜穿刺注入。②大鼠用戊巴比妥钠(20mg/kg体重)及氯胺酮(60mg/kg体重)混合液肌肉注射麻醉,然后采用机械法破坏一侧迷路,用骨钳剪除部分骨室泡骨壁;在显微镜下无菌切开圆窗膜,经耳蜗底暴露球囊、椭圆囊与壶腹嵴,镜下囊斑与壶腹嵴呈银白色膜状物质;用微型吸引器吸出球囊斑、椭圆囊斑与壶腹嵴,缝合伤口。术后密切观察模型的行为表现。全部实验结束后,再用戊巴比妥钠麻醉,对大鼠和豚鼠作开胸术,暴露心脏,经左心室切口向主动脉插管,用含0.5%亚硝酸钠的温生理盐水和溶解在磷酸缓冲液中的10%甲醛溶液灌流,处死动物,取出颞骨标本,作病理组织切片,镜下观察前庭结构的形态学变化。(2)模型特点  注射氯仿后豚鼠出现第一个体征,即出现以平衡失调为特征的一组单侧前庭功能损害症候群,动物出现以水平方向为主的眼球震颇,慢相朝向损伤侧;约1min后出现第二个体征,动物沿身体长轴向用药侧连续翻滚,1min后逐渐缓慢,停止翻滚;旋即出现第三个体征,动物沿地面垂直轴向用药侧连续转圈爬行、伴头部向用药侧倾斜20...
发布时间: 2019 - 08 - 29
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(1)复制方法  首先将透析袋放入0.5mol/L的EDTA溶液中,煮0.5h后弃去溶液,更换蒸馏水再煮3次,然后贮存在含0.01%叠氮钠的蒸馏水中,4℃保存备用。取体重为1.5~2.0kg的新西兰兔,用麻醉方法急性处死后,剥离其口腔黏膜组织,用匀浆器制备匀浆后,超声波震荡,低温离心,保留沉淀物,取上清液再作透析以滤过小分子物质,将大分子蛋白留于透析袋内。透析过程同法反复5次,最后将袋内物质冷冻干燥,获得粉末状蛋白作为抗原,置-70℃低温冰箱备用。取1.5~2.0kg体重的新西兰兔,用预先提取的口腔黏膜蛋白12.5mg溶于0.5ml磷酸缓冲液中,再加入0.5ml的完全弗氏佐剂呈乳化液。在家兔脊柱两侧皮内注射上述组织乳化液1ml,共注射20点。每隔2周同法注射1次,共注射5次。于不同时间切取口腔黏膜作常规病理组织切片光镜下检查。(2)模型特点  造模早期模型兔即开始局部黏膜充血,继而发生溃疡,于第2次注射抗原后的第8日起,动物口腔黏膜均可出现溃疡。溃疡病变多发生在动物的上、下唇,其次是牙龈和口底黏膜。溃疡直径为1~5mm,主要呈圆形或椭圆形,边缘较整齐,其表面覆盖着一层黄色假膜;模型制作过程中溃疡一般2~3d可自行愈合,后又复发。镜下口腔黏膜病理组织学观察显示,黏膜上皮坏死脱落,溃疡表面覆盖有大量中性粒细胞和纤维素样渗出物,溃疡底部小血管扩张充血,并伴有中性粒细胞...
发布时间: 2019 - 08 - 26
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(1)动物模型复制方法  主要利用转基因或基因敲除技术,研究某些基因表达产物变化在哮喘发生中的作用。(2)动物模型特点1)转录因子GATA-3转基因小鼠  该模型的IL-4、 IL-5、白细胞介素13(IL-13)合成减少,致敏激发产生的气道EOS浸润、黏液分泌,IgE合成均明显减轻。GATA-3调控Th2类细胞因子的表达,消除GATA-3活性可减缓Th2细胞反应,故有可能成为哮喘治疗的新靶点。2)CD23转基因和基因敲除小鼠  抗CD23抗体能够抑制OVA诱发的Balc/c小鼠哮喘模型的IgE、IgG1合成,阻止肺部EOS浸润及AHR产生。但CD23转基因小鼠致敏激发产生的EOS浸润及气道高反应性增加的程度却与T、B细胞CD23表达呈显著负相关。CD23-/-(基因敲除)小鼠致敏激发产生的哮喘表现亦重于CD23+/+小鼠,提示 CD23不仅促进哮喘发生,还可能对过敏反应和AHR起负调节作用。(3)动物模型比较医学  支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞(EOS)、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎性细胞参与的慢性气道炎症,并由此导致患者的气道高反应性(AHR),从而引起气道阻塞,气流受限。支气管哮喘发病机制复杂,鉴于直接进行人体试验的局限性,有关病因的确定、发病机制的探索、新治疗方法的评价、新药的研究与开发在相当程度上均需通过动物实验进行,因此支气管哮喘动...
发布时间: 2019 - 08 - 23
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